[检验标本的影响因素]影响血液标本的三大因素

检验目的 检验长期以来备受医生和患者关注,主要在于它们是受检者在各种生
理状态下的极好标志,了解身体本身存在的状况。 分析前:选定项目、患者准备、采集标本、标本运送、标本验收 全过程质量控制分析中:标本检测、登记及发出报告
分析后:检验结果的解释、做出诊断及提出治疗方案
根据美国技师协会统计,不合理的结果占1.3%,其中分析前占61-67%; 分析中占10-17%;分析后占22-25%
国内临床检验中误差分析显示影响检验结果的因素60-80%都来自分析前 。
一、 明确导致检测结果发生差错的原因,是保证检测质量的基础
生理因素 标本留取 内源性因素
检验标本与检验结果的重要关系
年龄
⏹ 新生儿WBC 、RBC ↑、老年人RBC ↓
⏹ 血脂成年人比儿童高、IG
性别
⏹ RBC 、HB 、HCT 、血脂男高于女
⏹ 血沉、某些激素女高于男
饮食
⏹ 纯碳水化合物饮食尿管型阳性
⏹ 进食新鲜动物食品(鱼、牛乳、鸡蛋、贝类、动物肉等)和菜果类食品(绿叶菜、萝卜、香蕉、葡萄等)使便隐血试验出现假阳性反应。
⏹ 进食含脂肪高的食物后可使甘油三酯明显升高数倍
⏹ 食用高糖食物两小时内可使血糖迅速升高;
⏹ 酒后WBC 、Hb ↑ ALT、
锻炼
⏹ 剧烈运动、冷浴后WBC ↑;HB ↑,PC ↑ 尿蛋白可出现阳性;尿管型阳性 ⏹ 剧烈锻炼后CK 水平升高,可达1000U/L,CK-MB 组分也会释放。
⏹ 锻炼后数小时血清总蛋白浓度可增加4-8 g/L;可使肾上腺素、去钾肾上腺素、高血糖素、皮质醇、促皮质激素和生长激素水平增加,胰岛素水平则降低,引起葡萄糖水平增加。因为激素拮抗胰岛素所致糖原异生的结果。
季节
⏹ PC春季较低,冬季较高; 夏季维生素D 水平较高
⏹ 冬季TG 水平较低,总胆固醇水平稍增加
海拔高度
⏹ 海拔对血液中的某些成分有一定的影响如在1400米高度,红细胞和HB 水平增高8%。 ⏹ 在3600米时,CRP 水平增高65%。
⏹ 肾素、转铁蛋白等随着高度的增加而降低。
⏹
生理状况
⏹ 月经期、妊娠后期和分娩WBC ↑RBC ↓;月经来潮前PC ↓
⏹ 情绪突变时WBC ↑;发烧或寒冷尿蛋白可出现阳性;
药物
⏹ 注射肾上腺素后 WBC↑;输入青霉素尿蛋白可出现阳性;
⏹ 利福平、氯丙嗪、水杨酸盐等药物使尿胆红素试验成假阳性,
⏹ 乙酰水杨酸、磺胺等尿隐血试验成假阳性;
⏹ 卡那霉素、先锋霉素、消炎痛等尿管型阳性;
⏹ 标本中维生素C 可造成尿胆红素、尿隐血、尿糖等试验假阴性。
⏹ 铁剂、阿司匹林、消炎痛等使便隐血试验出现假阳性反应;
周期性变化
⏹ 正常人WBC 上午比下午高;
⏹ PC 每天有6-10%的波动,早晨较低,午后较高;
⏹ 血肌红蛋白上午9点最高,下午6-12点最低;
⏹ 皮质醇,其峰值在上午6:00左右,晚上和午夜其水平逐渐降低。
标本采集的部位及放置时间
⏹ 采血方式 PC静脉血比手指血(耳垂血)约高8%
⏹ 放置时间 尿标本; 血糖 ; CK(室温4h 或4℃12h 即可使CK 失活) 、乙肝五项 ↑
采血的姿势
⏹ 从仰卧到直立血清总蛋白约低3-5g/L;相反胆固醇水平↑10%和TG 水平↑12%。
扎止血带时间
⏹ 降低。低氧效应迫使钾离开细胞,引起血清钾水平假性升高。在扎止血带后放血时,反复握紧拳头,可以引起钾增高1~2mmol/L。
⏹ 应用止血带多于1min ,达到2 min 时,可以引起总胆固醇水平增加5%,如果止血带遗留5 min,它可增加10%-15%。
输液的影响
⏹ 一方面血液样品被稀释
⏹ 同时输入的治疗药物,明显影响某些待检物的浓度,不能反映患者真实病情。 ⏹ 应在患者输液前或输液停止后1-8h 再抽血检测。
⏹ 如为抢救病人,必须抽血时,不应从临近输液的位置采血,应从对侧手臂采血。 输液中和输液后2份血生化标本检验结果的比较
⏹ 序 号 钾 钠 氯 糖 总蛋白 白蛋白 胆固醇 甘油三酯
第1份 13.67 105.4 70.44 9.26 46.9 22.2 测不到 测不到
第2份 4.18 134.3 95.5 6.44 71.9 39.4 1.86 0.79 ⏹ ⏹
参考值 3.5~5.5 135~150 96~108 3.89~6.38 60~80 40~50 2.53~5.4 0.57~1.17
注: 单位 mmol/L
输液同侧采血和异侧采血作生化指标测定时结果差异
───────────────────────────────── 项目(%) 同侧抽血 异侧抽血 变化率(%) ───────────────────────────────── 肌酐(µmol/L) 106.2 132.7 -20 尿酸(mmol/L) 0.3 0.2 50 血糖(mmol/L) 37.7 11.9 216 尿素氮(mmol/L) 3.5 4.3 -19 钾(mmol/L) 2.7 3.7 -27 钠(mmol/L) 158.0 141.0 12 氯(mmol/L) 63.0 95.0 -34
───────────────────────────────── 溶血对标本的影响
⏹
⏹
⏹
⏹
⏹
⏹
⏹ 在ELISA 试验中如果标本严重溶血, 血红蛋白中有含有血红素集团, 其有类似过氧化物的活性, 在孵育的过程中吸附于固相, 发生显色反应. 在生化反应中造成的影响见表 溶血标本与正常标本对生化19项指标的测定结果比较 ───────────────────────────── 项目 溶血样本 正常样本 变化率(%) ───────────────────────────── 直接胆红质(µmol/L) 13.7 8.5 60.0
⏹ 间接胆红质(µmol/L) 27.4 5.1 433.3
⏹ 钙(µmol/L) 2.2 2.3 -4.4
⏹ ⏹ 碱性磷酸酶(U/L) 161.0 194.0 -17.0
⏹ ⏹ 胆汁酸(U/L) 6.8 7.3 -6.8
⏹ ⏹ 尿酸(mmol/L) 0.1 0.2 50.0
⏹ 血糖(mmol/L) 4.9 5.4 -10.2
⏹ 尿素氮(mmol/L) 3.2 2.8 13.5
⏹ ⏹ 天冬氨酸转氨酶(U/L) 337.0 94.0 258.5
⏹ 乳酸脱氢酶(U/L) 3555.0 442.0 704.3
⏹ 羟丁酸脱氢酶(U/L) 2024.0 178.0 1037.1
⏹ 钾(mmol/L) 8.6 4.5 91.1
⏹ 钠(mmol/L) 111.0 137.0 -19.0
⏹ 氯(mmol/L) 105.0 100.0 5.0
⏹ ─────────────────────────────
抗凝剂的影响
⏹ 柠檬酸、氟化物等抑制CK 、淀粉酶活性
⏹ 肝素是PCR 反应中Taq 酶的强烈抑制剂
不恰当采样管引起K 、Na 、Cl 结果变化(mmol/L)
⏹ ────────────────────────────────────
⏹ 管 K Na Cl
⏹ 号 血清 枸橼 变化率 血清 枸橼 变化率 血清 枸橼 变化率
⏹ 酸钠 (%) 酸钠 (%) 酸钠 (%)
⏹ ────────────────────────────────────
⏹ 1 4.14 4.73 14.3 144 159 10.4 105 80 -23.8
⏹ 2 4.30 5.12 19.1 139 156 12.2 101 75 -25.7
⏹ 3 3.9 4.77 22.3 138 149 8.0 100 77 -23.0
⏹ 4 3.80 4.64 22.1 142 158 11.3 104 73 -29.8
⏹ 5 4.10 5.04 22.9 143 163 14.0 100 71 -29.0
⏹ ──────────────────────────────────── 二、严格遵守标本留取的操作规程是保证检验质量的重要举措
1. 样本采集的时间
血液标本
⏹ 外周血
⏹ 静脉血 ⑴ 早晨空腹样本采集,(12h )
空腹抽血的原因
⏹ ▲ 许多抽血化验项目的正常参考值均来源于正常人群空腹抽血的结果,经统计分析后得到的。
⏹ ▲ 进食后可血液中许多化学成分可发生改变,因而不能得到准确的化验值。在头天晚间进食后到第二天清晨,空腹时间达十小时以上,体内各种物质已达到相对稳定和平衡,食物性因素对血液成分基本没有影响,此时抽血可得到相对稳定准确的结果。
⏹ ▲ 人体生物周期的变化,某些项目指标因采血时间不同,变化较大,因此在同一时间测定的结果具有可比性。
⏹ ▲ 人在早间运动较少
⑵急诊样本采集
⑶适时样本采集 糖耐量试验
尿液标本
收集尿标本时间取决于被测成分。
⏹ 晨尿 是指清晨起床后的第一次尿标本,较浓缩和酸化,有形成分相对集中便于观察。
⏹ 随机尿 即随意一次尿,留取方便,但受饮食、运动、药物影响较甚,易于出现假阳性和假阴性结果,如饮食性蛋白尿,饮食性糖尿,维生素C 干扰潜血结果等。 ⏹ 餐后尿 适用于尿糖,尿蛋白和尿胆原的检查,此时的尿标本可增加试验敏感性,检出较轻微的病变。
⏹ 定时尿 12小时尿细胞计数即Addis 计数 ,24小时尿中化学物质的定量,包括蛋白,糖,尿17-酮、17-羟类固醇,儿茶酚胺,Ca2+等,检测不同的物质,选择不同的防腐剂防腐。
粪便标本
⏹ 采集时要求用干净的竹签选取含有粘液、脓血等异常病变成分的粪便。 ⏹ 找寄生虫虫体及作虫卵计数应收集24小时粪便。
⏹ 查痢疾阿米巴滋养体应于排便后立即检查,从有脓血和稀软处取材,保温送检。 ⏹ 隐血试验(化学法),试验前3日禁食肉类及含动物血食物并禁服铁剂,维生素C 等。
⏹ 所有粪便标本采集后1小时内应检查完毕,以防止有形成分受消化酶及pH 的破坏。 ⏹ 细菌培养 采样一定在发病早期、发烧时,应用抗菌素以前;特殊试验按照规律采集样本。 ⏹
2. 检验的时效性 胰腺炎(8-12小时出现,12-24小时达高峰) 肝炎
三、 人员的合作与正确配合是保证检验质量的前提 ⏹ 临床检验项目均是应医生的申请进行检测,测得结果提供给医生,以便观察、诊断和治疗。
⏹
⏹ 一个好的检验结果,都要经过三个重要阶段,需要医生、护士、患者和检验人员的多方配合。有些影响因素是与医护人员关系密切,而检验人员不易了解且无法防止的,例如药物、饮食、运动标本放臵时间对检验的影响等,通过与临床及时进行联系,当有这些因素时,能做出正确的解释或进行复查。 实验室检查结果可用性的根本原因在于它们是病人在各种生理状态下的极好标志,标本的留取
与检验质量的准确度和精确度是息息相关的, 是不可缺少的一个组成部分。
检验医学作为疾病诊疗的重要环节,长期以来备受医生和患者关注。为了使检验结果更好地服务于临床,必须对检验的全过程进行质量控制。
⏹ 所谓全面质量管理,是指从临床医师申请化验开始至实验室完成检测,以及登记和发出报告及对检验结果的解释,所采用的一系列保证实验质量的方法和措施的全过程,包括分析前、分析中、分析后质量控制。分析前质量控制是实验室全面质量控制的重要组成部分。国内外临床检验中误差分析显示影响检验结果的因素60-80%都来自分析前 。
一、 明确导致检测结果发生差错的原因,是保证检测质量的基础
生理因素
⏹ 标本留取
⏹ 内源性因素 ⏹
年龄
新生儿WBC ↑RBC ↑
⏹ 老年人RBC ↓
⏹ 血脂成年人比儿童高 ⏹
性别
RBC 、HB 、血沉
⏹ 血脂男高于女
⏹ 某些激素女高于男 ⏹
饮食
⏹
⏹
⏹
⏹
⏹ 酒后WBC ↑ 纯碳水化合物饮食尿管型阳性 进食新鲜动物食品(鱼、牛乳、鸡蛋、贝类、动物肉等)和菜果类食品(绿叶菜、萝卜、香蕉、葡萄等)使便隐血试验出现假阳性反应。 进食含脂肪高的食物后可使甘油三酯明显升高数倍 食用高糖食物两小时内可使血糖迅速生高。
锻炼
⏹ 剧烈运动、冷浴后WBC ↑;HB ↑,PC ↑ 尿蛋白可出现阳性;尿管型阳性
⏹
⏹ 剧烈锻炼后CK 水平升高,可达1000U/L,CK-MB 组分也会释放。 锻炼后数小时血清总蛋白浓度可增加4-8 g/L;可使肾上腺素、去钾肾上腺素、高血糖素、皮质醇、促皮质激素和生长激素水平增加 胰岛素水平则降低,引起葡萄糖水平增加。因为激素拮抗胰岛素所致糖原异生的结果。 季节
PC 春季较低,冬季较高
⏹ 夏季维生素D 水平较高
⏹ 冬季TG 水平较低,总胆固醇水平稍增加 ⏹
高度
海拔对血液中的某些成分有一定的影响如在1400米高度,红细胞和HB 水平增高8%。
⏹ 在3600米时,CRP 水平增高65%。
⏹ 肾素、转铁蛋白等随着高度的增加而降低。 ⏹
生理状况
月经期、妊娠后期和分娩WBC ↑RBC ↓;
⏹ 情绪突变时WBC ↑;
⏹ 月经来潮前PC ↓
⏹ 发烧或寒冷尿蛋白可出现阳性; ⏹
药物
⏹
⏹
⏹
⏹
⏹
⏹
⏹ 注射肾上腺素后 WBC↑; 输入青霉素尿蛋白可出现阳性; 利福平、氯丙嗪、水杨酸盐等药物使尿胆红素试验成假阳性, 乙酰水杨酸、磺胺等尿血红蛋白试验成假阳性; 卡那霉素、先锋霉素、消炎痛等尿管型阳性; 标本中维生素C 可造成尿胆红素、尿血红蛋白、尿糖等试验假阴性。 铁剂、阿司匹林、消炎痛等使便隐血试验出现假阳性反应;
周期性变化
正常人WBC 上午比下午高;
⏹ PC 每天有6-10%的波动,早晨较低,午后较高;
⏹ 血肌红蛋白上午9点最高,下午6-12最低;
⏹ 皮质醇,其峰值在上午6:00左右,晚上和午夜其水平逐渐降低。 ⏹ 标本采集的影响因素
⏹ 采血方式 PC静脉血比手指血(耳垂血)约高8%
⏹ 采样时间 一般检验早晨空腹抽血,细菌培养采样一定在早期、发烧时,应用抗菌素以前;特殊试验按照规律采集样本 放臵时间 尿标本放臵过久尿蛋白可出现阳性;测血糖的全血标本在室温下酵解的速率是5%/h;
室温4h 或4℃ 12h即可使CK 失活。在ELISA 试验中,标本在2-8℃下保存时间过长,IgG 可聚合成多聚体,在间接法ELISA 中会导致本底过深,甚至造成假阳性;相反,时间太短,标本凝固不全,易造成假阳性
采血的姿势
⏹ 从仰卧到直立 血清总蛋白约低3-5g/L ;
⏹ 相反,从直立位到仰卧位改变, 可减少胆固醇水平10%和TG 水
平12%。
扎止血带时间过长,产生静脉淤血,促进糖原无氧酵解和血浆乳酸聚积,血液PH 降低。低氧效应迫使钾离开细胞,引起血清钾水平假性升高。在扎止血带后放血时,反复握紧拳头,可以引起钾增高1~2mmol/L。
应用止血带多于1min ,达到2 min 时,可以引起总胆固醇水平增加5%,如果止血带遗留5 min,它可增加10%-15%。
▲ 许多抽血化验项目的正常参考值均来源于正常人群空腹抽血的结果,经统计分析后得到的。
▲ 进食后可血液中许多化学成分可发生改变,因而不能得到准确的化验值。在头天晚间进食后到第二天清晨,空腹时间达十小时以上,体内各种物质已达到相对稳定和平衡,食物性因素对血液成分基本没有影响,此时抽血可得到相对稳定准确的结果。 扎止血带时间 ⏹ ⏹ 空腹抽血的原因 ⏹ ⏹
⏹ ▲ 人体生物周期的变化,某些项目指标因采血时间不同,变化较大,因此在同一时间测定的
结果具有可比性。
▲ 人在早间运动较少 ⏹
输液的影响
一方面血液样品被稀释
⏹ 同时输入的治疗药物,明显影响某些待检物的浓度,不能反映患者真实
病情。
⏹ 应在患者输液前或输液停止后1-8h 再抽血检测。
⏹ 如为抢救病人,必须抽血时,不应从临近输液的位置采血,应从对侧手
臂采血。 ⏹
输液中和输液后2份血生化标本检验结果的比较
⏹ 序 号 钾 钠 氯 糖 总蛋白 白蛋白 胆固醇 甘油三酯
第1份 13.67 105.4 70.44 9.26 46.9 22.2 测不到 测不到 ⏹
第2份 4.18 134.3 95.5 6.44 71.9 39.4 1.86 0.79
参考值 3.5~5.5 135~150 96~108 3.89~6.38 60~80 40~50 2.53~5.4 0.57~1.17
注: 单位 mmol/L
⏹
输液同侧采血和异侧采血作生化指标测定时结果差异
───────────────────────────────── 项目(%) 同侧抽血 异侧抽血 变化率(%)
─────────────────────────────────
肌酐(µmol/L) 106.2 132.7 -20
尿酸(mmol/L) 0.3 0.2 50
血糖(mmol/L) 37.7 11.9 216
尿素氮(mmol/L) 3.5 4.3 -19
钾(mmol/L) 2.7 3.7 -27
钠(mmol/L) 158.0 141.0 12
氯(mmol/L) 63.0 95.0 -34
───────────────────────────────── 溶血对标本的影响
⏹ 在ELISA 试验中如果标本严重溶血, 血红蛋白中有含有血红素集团, 其有类似过氧
化物的活性, 在孵育的过程中吸附于固相, 发生显色反应. 在生化反应中造成的影响见表
─────────────────────────────
项目 溶血样本 正常样本 变化率(%)
─────────────────────────────
丙氨酸基转胺酶(U/L) 44.0 20.0 120.0
直接胆红质(µmol/L) 13.7 8.5 60.0
间接胆红质(µmol/L) 27.4 5.1 433.3
钙(µmol/L) 2.2 2.3 -4.4
磷(µmol/L) -4.5 1.7 -360.4
碱性磷酸酶(U/L) 161.0 194.0 -17.0
转肽酶(U/L) 3.0 255.0 -98.8
胆汁酸(U/L) 6.8 7.3 -6.8
肌酐(µmol/L) 84.1 43.4 93.9
尿酸(mmol/L) 0.1 0.2 50.0
血糖(mmol/L) 4.9 5.4 -10.2
尿素氮(mmol/L) 3.2 2.8 13.5
肌酸激酶(U/L) 169.0 12.0 1308.3
天冬氨酸转氨酶(U/L) 337.0 94.0 258.5
乳酸脱氢酶(U/L) 3555.0 442.0 704.3
羟丁酸脱氢酶(U/L) 2024.0 178.0 1037.1
钾(mmol/L) 8.6 4.5 91.1
钠(mmol/L) 111.0 137.0 -19.0
氯(mmol/L) 105.0 100.0 5.0
───────────────────────────── ⏹ 溶血标本与正常标本对生化19项指标的测定结果比较 ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹
⏹
抗凝剂的影响
⏹
柠檬酸、氟化物等抑制CK 、淀粉酶活性
肝素是PCR 反应中Taq 酶的强烈抑制剂
不恰当采样管引起K 、Na 、Cl 结果变化(mmol/L) ⏹
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⏹ ──────────────────────────────────── 管 K Na Cl 号 血清 枸橼 变化率 血清 枸橼 变化率 血清 枸橼 变化率 酸钠 (%) 酸钠 (%) 酸钠 (%) ──────────────────────────────────── 1 4.14 4.73 14.3 144 159 10.4 105 80 -23.8 2 4.30 5.12 19.1 139 156 12.2 101 75 -25.7 3 3.9 4.77 22.3 138 149 8.0 100 77 -23.0 4 3.80 4.64 22.1 142 158 11.3 104 73 -29.8 5 4.10 5.04 22.9 143 163 14.0 100 71 -29.0 ────────────────────────────────────
二、严格遵守标本留取的操作流程是保证检验质量的重要举措
标本留取是实验室样品管理十分重要的一个环节。
样品失实,无论是变质失效、编错号、漏掉遗失等等,均
造成检验结果失实和不能发出报告,因此在检验质量控制
中应重视对样品的管理,具体应做到:
⑴ 实验室应有文件化程序和适当设备来保持对样品
在实验室全过程中(储存、处臵、准确检测)不发生非正
常的变质和损坏。
⑵ 接受样品时应详细记录其状态,样品有疑问或不
符合规定要求时,尽快与有关方面联系。
⑶ 实验室应建立检测样品的唯一识别系统,以保证
任何时候对样品的识别不发生混淆。
各种标本的收集方法及注意事项
⏹ 化验常见的标本一般包括血液(指血,静脉血),尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液,精液,阴道分泌物等,这些标本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。
血液标本
外周血
⏹ 静脉血 应根据检测物质的需要,一般的常规检验的血标本,理想地应指令患者在采样前空腹过夜,(12h ) ⏹
尿液标本
⏹
⏹
⏹ 收集尿标本时间取决于被测成分。 晨尿 是指清晨起床后的第一次尿标本,较浓缩和酸化,有形成分 相对集中便于观察。 随机尿 即随意一次尿,留取方便,但受饮食、运动、药物影响较甚,易于出现假阳性和假阴性结果,如饮食性蛋白尿,饮食性糖尿,维生素C 干扰潜血结果等。
⏹
⏹ 餐后尿 适用于尿糖,尿蛋白和尿胆原的检查,此时的尿标本可增加试验敏感性,检出较轻微的病变。 定时尿 12小时尿细胞计数即Addis 计数 ,24小时尿中化学物质的定量,包括蛋白,糖,尿17-
酮、17-羟类固醇,儿茶酚胺,Ca2+等,检测不同的物质,选择不同的防腐剂防腐。
粪便标本
⏹
⏹
⏹
⏹
⏹ 采集时要求用干净的竹签选取含有粘液、脓血等异常病变成分的粪便 。找寄生虫虫体及作虫卵计数应收集24小时粪便。 查痢疾阿米巴滋养体应于排便后立即检查,从有脓血和稀软处取材,保温送检。 隐血试验(化学法),试验前3日禁食肉类及含动物血食物并禁服铁剂,维生素C 等。 所有粪便标本采集后1小时内应检查完毕,以防止有形成分受消化酶及pH 的破坏。 脑脊液标本
脑脊液标本采集后立即送检,放臵过久细胞变性,破坏,导致计数和分类不准;
⏹ 有些化学物质如葡萄糖等将分解含量减少;
⏹ 细菌发生自溶影响细菌的检出率。
⏹ 脑脊液抽取后一般分装三个无菌管,第一管作细菌培养,第二管作化学
分析和免疫学检查,第三管作一般性状及显微镜检查,三管的顺序不宜颠倒。 ⏹
胸腹水标本
一般也分装三管,一管作常规细胞学检查,一管生化检查,一
管细菌培养,顺序以与脑脊液相同为宜。
前列腺液标本
前列腺液标本由前列腺按摩后采集,液
量少时直接滴在载玻片上及时送检,须注意
防止标本蒸干,量多时收集在洁净干燥的试
管中。若按摩不出前列腺液,可检查按摩后
的尿液沉渣。
精液标本
⏹ 精液标本采集前应禁欲3-7天,排净尿液后可用手淫法或其他方法将精
液直接排入干净的容器中,保温并及时送检。由于精子生成日间变动较大,一般应检查2-3次(每次间隔1-2周)方可做诊断。
阴道分泌物标本
⏹ 阴道标本采集前24小时应禁止房事、盆浴、阴道检查、阴道灌洗及局部上药等,取材所用器械需清洁。一般用盐水浸湿的棉拭子自阴道深部或阴道穹后部、宫颈管口等处取材,制成生理盐水涂片后观察阴道分泌物标本,经期的女性患者不宜检查阴道分泌物标本。
保证检验结果的质量:检验结果的失真,不仅浪费人力物力,甚至延误病人的诊断和治疗; 作为一项检测医院检验科质量的重要指标
作为沟通检验人员与医护人员的一种桥梁,进而提高检验人员在医院的地位; 作为减少以致杜绝医疗纠纷的重要环节
减少不必要的浪费 拒收不合格标本的重要意义 ⏹ ⏹ ⏹ ⏹
⏹
三、 人员的合作与正确配合是保证检验质量的前提 临床检验项目均是应医生的申请进行检测,测得结果提供给医生,以便观察、诊断和治疗。
⏹ 一个好的检验结果,都要经过三个重要阶段,需要医生、护士、患者和检验人员的多方配合。有些影响因素是与医护人员关系密切,而检验人员不易了解且无法防止的,例如药物、饮食、运动标本放置时间对检验的影响等,通过与临床及时进行联系,当有这些因素时,能做出正确的解释或进行复查。
⏹ 实验室检查结果可用性的根本原因在于它们是病人在各种生理状态下的极好标志,标本的留取与检验质量的准确度和精确度是息息相关的, 是不可缺少的一个组成部分。
⏹ 临床检验质量取决于从标本留取到检验报告发出前的每一个细致环节,只有严格遵守各个环节,才算是一个完整的质量控制体系,才能保证实验的科学性、准确性,及时为临床提供可靠的诊断依据,更好的为医学科学的发展服务。 ⏹
⏹ 检验医学的任务不仅仅是被动地提供数据或结果,由于国内历史原因,检验科在过去很长一个时期限被定位于“医疗辅助科室”,即检验科的任务似乎只是向临床医生提供所要求的检验结果,甚至检验科主动提供一些未受指定的检验结果都被认为是“越位”,
从现代医学的要求来说检验科本应属于诊断科室,除了准确、及时地提供检验信息外还要积极参与诊断、病情分析和监测,并参与预防医学领域,其活动空间应是很广阔的。
今后客观形势的发展必然要对检验医学队伍的素质、水平和知识结构提出新的挑战,同时,临床医生也有必要进一步增加对不断前进中的检验医学和检验科工作的了解,更新知识,以保持和推动更好的合作,这种合作必将对今后医学的进步产生深远的影响. ⏹ ⏹
四 良好的检验人员素质是保证检验质量的关键
⏹ 人是实验室质量保证体系中最积极,最活跃的因素,起主导作用,首先要具有系统的理论知识基础和专业水平。检验人员工作期间必须对检验设备性能和检测试剂及使用方法了如指掌,工作中要严格遵守操作规程,对各种仪器设备及试剂加以妥善维护和保管,认真的做好校正工作 。
其次是对于来源于临床的标本要做好查对工作,验收是否符合标本的留取要求,同时在检查方法上不断创新,以达到提高检验质量目的,尤其是应大量提高质量控制方面的分析能力,判断能力,计算能力,以适应随着医疗卫生改革的不断深入,对于临床检验质量的迫切要求。 总之,临床检验质量取决于从标本留取到检验报告发出前的每一个细致环节,只有严格遵守各个环节,才算是一个完整的质量控制体系,才能保证实验的科学性、准确性,及时为临床提供可靠的诊断依据,更好的为医学科学的发展服务。 ⏹ ⏹
⏹ 检验医学的任务不仅仅是被动地提供数据或结果,由于国内历史原因,检验科在过去很长一个时期限被定位于“医疗辅助科室”,即检验科的任务似乎只是向临床医生提供所要求的检验结果,甚至检验科主动提供一些未受指定的检验结果都被认为是“越位”,
从现代医学的要求来说检验科本应属于诊断科室,除了准确、及时地提供检验信息外还要积极参与诊断、病情分析和监测,并参与预防医学领域,其活动空间应是很广阔的。
今后客观形势的发展必然要对检验医学队伍的素质、水平和知识结构提出新的挑战,同时,临床医生也有必要进一步增加对不断前进中的检验医学和检验科工作的了解,更新知识,以保持和推动更好的合作,这种合作必将对今后医学的进步产生深远的影响. ⏹ ⏹
四 良好的检验人员素质是保证检验质量的关键
⏹ 人是实验室质量保证体系中最积极,最活跃的因素,起主导作用,首先要具有系统的理论知识基础和专业水平。检验人员工作期间必须对检验设备性能和检测试剂及使用方法了如指掌,工作中要严格遵守操作规程,对各种仪器设备及试剂加以妥善维护和保管,认真的做好校正工作 。
其次是对于来源于临床的标本要做好查对工作,验收是否符合标本的留取要求,同时在检查方法上不断创新,以达到提高检验质量目的,尤其是应大量提高质量控制方面的分析能力,判断能力,计算能力,以适应随着医疗卫生改革的不断深入,对于临床检验质量的迫切要求。 总之,临床检验质量取决于从标本留取到检验报告发出前的每一个细致环节,只有严格遵守各个环节,才算是一个完整的质量控制体系,才能保证实验的科学性、准确性,及时为临床提供可靠的诊断依据,更好的为医学科学的发展服务。 ⏹ ⏹
检验医学作为疾病诊疗的重要环节,长期以来备受医生和患者关注。为了使检验结果更好地服务于临床,必须对检验的全过程进行质量控制。
⏹ 所谓全面质量管理,是指从临床医师申请化验开始至实验室完成检测,以及登记和发出报告及对检验结果的解释,所采用的一系列保证实验质量的方法和措施的全过程,包括分析前、分析中、分析后质量控制。分析前质量控制是实验室全面质量控制的重要组成部分。国内外临床检验中误差分析显示影响检验结果的因素60-80%都来自分析前 。
一、 明确导致检测结果发生差错的原因,是保证检测质量的基础 生理因素
⏹ 标本留取
⏹ 内源性因素 ⏹
年龄
新生儿WBC ↑
⏹ 新生儿RBC ↑老年人RBC ↓
⏹ 血脂成年人比儿童高 ⏹
性别
RBC
⏹ HB
⏹ 血沉
⏹ 血脂男高于女
⏹ 某些激素女高于男 ⏹
饮食
⏹
⏹
⏹
⏹
⏹ 酒后WBC ↑ 纯碳水化合物饮食尿管型阳性 进食新鲜动物食品(鱼、牛乳、鸡蛋、贝类、动物肉等)和菜果类食品(绿叶菜、萝卜、香蕉、葡萄等)使便隐血试验出现假阳性反应。 进食含脂肪高的食物后可使甘油三酯明显升高数倍 食用高糖食物两小时内可使血糖迅速生高。
锻炼
⏹ 剧烈运动、冷浴后WBC ↑;HB ↑,PC ↑ 尿蛋白可出现阳性;尿管型阳性
剧烈锻炼后CK 水平升高,可达1000U/L,CK-MB 组分也会释放。
锻炼后数小时血清总蛋白浓度可增加4-8 g/L;可使肾上腺素、去钾肾上腺素、高血糖素、皮质醇、促皮质激素和生长激素水平增加
胰岛素水平则降低,引起葡萄糖水平增加。因为激素拮抗胰岛素所致糖原异生的结果。 ⏹ ⏹ ⏹
季节
⏹ PC 春季较低,冬季较高
夏季维生素D 水平较高
冬季TG 水平较低,总胆固醇水平稍增加
海拔对血液中的某些成分有一定的影响如在1400米高度,红细胞和HB 水平增高8%。
在3600米时,CRP 水平增高65%。
肾素、转铁蛋白等随着高度的增加而降低。 ⏹ ⏹ 高度 ⏹ ⏹ ⏹
生理状况
月经期、妊娠后期和分娩WBC ↑RBC ↓;
⏹ 情绪突变时WBC ↑;
⏹ 月经来潮前PC ↓
⏹ 发烧或寒冷尿蛋白可出现阳性; ⏹
药物
⏹
⏹
⏹
⏹
⏹ 注射肾上腺素后 WBC↑; 输入青霉素尿蛋白可出现阳性; 利福平、氯丙嗪、水杨酸盐等药物使尿胆红素试验成假阳性, 乙酰水杨酸、磺胺等尿血红蛋白试验成假阳性; 卡那霉素、先锋霉素、消炎痛等尿管型阳性;
⏹
⏹ 标本中维生素C 可造成尿胆红素、尿血红蛋白、尿糖等试验假阴性。 铁剂、阿司匹林、消炎痛等使便隐血试验出现假阳性反应;
周期性变化
正常人WBC 上午比下午高;
⏹ PC 每天有6-10%的波动,早晨较低,午后较高;
⏹ 血肌红蛋白上午9点最高,下午6-12最低;
⏹ 皮质醇,其峰值在上午6:00左右,晚上和午夜其水平逐渐降低。 ⏹ 标本采集的影响因素
⏹
⏹
⏹ 采血方式 PC静脉血比手指血(耳垂血)约高8% 采样时间 一般检验早晨空腹抽血,细菌培养采样一定在早期、发烧时,应用抗菌素以前;特殊试验按照规律采集样本 放臵时间 尿标本放臵过久尿蛋白可出现阳性;测血糖的全血标本在室温下酵解的速率是5%/h;
室温4h 或4℃ 12h即可使CK 失活。在ELISA 试验中,标本在2-8℃下保存时间过长,IgG 可聚合成多聚体,在间接法ELISA 中会导致本底过深,甚至造成假阳性;相反,时间太短,标本凝固不全,易造成假阳性
采血的姿势
⏹ 从仰卧到直立 血清总蛋白约低3-5g/L ;
⏹ 相反,从直立位到仰卧位改变, 可减少胆固醇水平10%和TG 水
平12%。
扎止血带时间过长,产生静脉淤血,促进糖原无氧酵解和血浆乳酸聚积,血液PH 降低。低氧效应迫使钾离开细胞,引起血清钾水平假性升高。在扎止血带后放血时,反复握紧拳头,可以引起钾增高1~2mmol/L。
应用止血带多于1min ,达到2 min 时,可以引起总胆固醇水平增加5%,如果止血带遗留5 min,它可增加10%-15%。
▲ 许多抽血化验项目的正常参考值均来源于正常人群空腹抽血的结果,经统计分析后得到的。
▲ 进食后可血液中许多化学成分可发生改变,因而不能得到准确的化验值。在头天晚间进食后到第二天清晨,空腹时间达十小时以上,体内各种物质已达到相对稳定和平衡,食物性因素对血液成分基本没有影响,此时抽血可得到相对稳定准确的结果。 扎止血带时间 ⏹ ⏹ 空腹抽血的原因 ⏹ ⏹
⏹ ▲ 人体生物周期的变化,某些项目指标因采血时间不同,变化较大,因此在同一时间测定的
结果具有可比性。
⏹ ▲ 人在早间运动较少
输液的影响
一方面血液样品被稀释
⏹ 同时输入的治疗药物,明显影响某些待检物的浓度,不能反映患者真实
病情。
⏹ 应在患者输液前或输液停止后1-8h 再抽血检测。
⏹ 如为抢救病人,必须抽血时,不应从临近输液的位置采血,应从对侧手
臂采血。 ⏹
输液中和输液后2份血生化标本检验结果的比较
⏹ 序 号 钾 钠 氯 糖 总蛋白 白蛋白 胆固醇 甘油三酯
第1份 13.67 105.4 70.44 9.26 46.9 22.2 测不到 测不到 ⏹
第2份 4.18 134.3 95.5 6.44 71.9 39.4 1.86 0.79
参考值 3.5~5.5 135~150 96~108 3.89~6.38 60~80 40~50 2.53~5.4 0.57~1.17
注: 单位 mmol/L
⏹
输液同侧采血和异侧采血作生化指标测定时结果差异
─────────────────────────────────
项目(%) 同侧抽血 异侧抽血 变化率(%) ──────────────────────
───────────
肌酐(µmol/L) 106.2 132.7 -20
尿酸(mmol/L) 0.3 0.2 50
血糖(mmol/L) 37.7 11.9 216
尿素氮(mmol/L) 3.5 4.3 -19
钾(mmol/L) 2.7 3.7 -27
钠(mmol/L) 158.0 141.0 12
氯(mmol/L) 63.0 95.0 -34
─────────────────────────────────
溶血对标本的影响
⏹ 在ELISA 试验中如果标本严重溶血, 血红蛋白中有含有血红素集团, 其有类似过氧
化物的活性, 在孵育的过程中吸附于固相, 发生显色反应.
在生化反应中造成的影响见表
─────────────────────────────
项目 溶血样本 正常样本 变化率(%)
─────────────────────────────
丙氨酸基转胺酶(U/L) 44.0 20.0 120.0
直接胆红质(µmol/L) 13.7 8.5 60.0
间接胆红质(µmol/L) 27.4 5.1 433.3
钙(µmol/L) 2.2 2.3 -4.4
磷(µmol/L) -4.5 1.7 -360.4
⏹ 溶血标本与正常标本对生化19项指标的测定结果比较 ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹ ⏹
⏹
⏹
⏹ 碱性磷酸酶(U/L) 161.0 194.0 -17.0 转肽酶(U/L) 3.0 255.0 -98.8 胆汁酸(U/L) 6.8 7.3 -6.8
溶血标本与正常标本对生化19项指标的测定结果比较
⏹
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⏹
⏹
⏹
⏹ 肌酐(µmol/L) 84.1 43.4 93.9 尿酸(mmol/L) 0.1 0.2 50.0 血糖(mmol/L) 4.9 5.4 -10.2 尿素氮(mmol/L) 3.2 2.8 13.5 肌酸激酶(U/L) 169.0 12.0 1308.3 天冬氨酸转氨酶(U/L) 337.0 94.0 258.5 乳酸脱氢酶(U/L) 3555.0 442.0 704.3 羟丁酸脱氢酶(U/L) 2024.0 178.0 1037.1 钾(mmol/L) 8.6 4.5 91.1 钠(mmol/L) 111.0 137.0 -19.0 氯(mmol/L) 105.0 100.0 5.0 ─────────────────────────────
抗凝剂的影响
⏹ 柠檬酸、氟化物等抑制CK 、淀粉酶活性
肝素是PCR 反应中Taq 酶的强烈抑制剂
不恰当采样管引起K 、Na 、Cl 结果变化(mmol/L) ⏹
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⏹ ──────────────────────────────────── 管 K Na Cl 号 血清 枸橼 变化率 血清 枸橼 变化率 血清 枸橼 变化率 酸钠 (%) 酸钠 (%) 酸钠 (%) ──────────────────────────────────── 1 4.14 4.73 14.3 144 159 10.4 105 80 -23.8 2 4.30 5.12 19.1 139 156 12.2 101 75 -25.7 3 3.9 4.77 22.3 138 149 8.0 100 77 -23.0 4 3.80 4.64 22.1 142 158 11.3 104 73 -29.8 5 4.10 5.04 22.9 143 163 14.0 100 71 -29.0 ────────────────────────────────────
二、严格遵守标本留取的操作流程是保证检验质量的重要举措
标本留取是实验室样品管理十分重要的一个环节。
样品失实,无论是变质失效、编错号、漏掉遗失等等,均
造成检验结果失实和不能发出报告,因此在检验质量控制
中应重视对样品的管理,具体应做到:
⑴ 实验室应有文件化程序和适当设备来保持对样品
在实验室全过程中(储存、处臵、准确检测)不发生非正
常的变质和损坏。
⑵ 接受样品时应详细记录其状态,样品有疑问或不
符合规定要求时,尽快与有关方面联系。
⑶ 实验室应建立检测样品的唯一识别系统,以保证
任何时候对样品的识别不发生混淆。
各种标本的收集方法及注意事项
⏹ 化验常见的标本一般包括血液(指血,静脉血),尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液,精液,阴道分泌物等,这些标本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。
血液标本
外周血
⏹ 静脉血 应根据检测物质的需要,一般的常规检验的血标本,理想地应指令患者在采样前空腹过夜,(12h ) ⏹
尿液标本
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⏹
⏹ 收集尿标本时间取决于被测成分。 晨尿 是指清晨起床后的第一次尿标本,较浓缩和酸化,有形成分 相对集中便于观察。 随机尿 即随意一次尿,留取方便,但受饮食、运动、药物影响较甚,易于出现假阳性和假阴性结果,如饮食性蛋白尿,饮食性糖尿,维生素C 干扰潜血结果等。 餐后尿 适用于尿糖,尿蛋白和尿胆原的检查,此时的尿标本可增加试验敏感性,检出较轻微的病变。 定时尿 12小时尿细胞计数即Addis 计数 ,24小时尿中化学物质的定量,包括蛋白,糖,尿17-酮、17-羟类固醇,儿茶酚胺,Ca2+等,检测不同的物质,选择不同的防腐剂防腐。 粪便标本
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⏹
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⏹ 采集时要求用干净的竹签选取含有粘液、脓血等异常病变成分的粪便 。找寄生虫虫体及作虫卵计数应收集24小时粪便。 查痢疾阿米巴滋养体应于排便后立即检查,从有脓血和稀软处取材,保温送检。 隐血试验(化学法),试验前3日禁食肉类及含动物血食物并禁服铁剂,维生素C 等。 所有粪便标本采集后1小时内应检查完毕,以防止有形成分受消化酶及pH 的破坏。 脑脊液标本
脑脊液标本采集后立即送检,放臵过久细胞变性,破坏,导致计数和分类不准;
⏹ 有些化学物质如葡萄糖等将分解含量减少;
⏹ 细菌发生自溶影响细菌的检出率。
⏹ 脑脊液抽取后一般分装三个无菌管,第一管作细菌培养,第二管作化学分析和免疫学检查,第三管作一般性状及显微镜检查,三管的顺序不宜颠倒。 ⏹
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胸腹水标本
一般也分装三管,一管作常规细胞学检查,一管生化检查,一管细菌培养,顺序以与脑脊液相同为宜。
前列腺液标本
前列腺液标本由前列腺按摩后采集,液
量少时直接滴在载玻片上及时送检,须注意
防止标本蒸干,量多时收集在洁净干燥的试
管中。若按摩不出前列腺液,可检查按摩后
的尿液沉渣。
精液标本
⏹ 精液标本采集前应禁欲3-7天,排净尿液后可用手淫法或其他方法将精液直接排入干净的容器中,保温并及时送检。由于精子生成日间变动较大,一般应检查2-3次(每次间隔1-2周)方可做诊断。
阴道标本采集前24小时应禁止房事、盆浴、阴道检查、阴道灌洗及局部上药等,取材所用器械需清洁。一般用盐水浸湿的棉拭子自阴道深部或阴道穹后部、宫颈管口等处取材,制成生理盐水涂片后观察阴道分泌物标本,经期的女性患者不宜检查阴道分泌物标本。
保证检验结果的质量:检验结果的失真,不仅浪费人力物力,甚至延误病人的诊断和治疗; 作为一项检测医院检验科质量的重要指标
作为沟通检验人员与医护人员的一种桥梁,进而提高检验人员在医院的地位; 作为减少以致杜绝医疗纠纷的重要环节
减少不必要的浪费 阴道分泌物标本 ⏹ 拒收不合格标本的重要意义 ⏹ ⏹ ⏹ ⏹
⏹
三、 人员的合作与正确配合是保证检验质量的前提 ⏹
⏹
⏹ 临床检验项目均是应医生的申请进行检测,测得结果提供给医生,以便观察、诊断和治疗。 一个好的检验结果,都要经过三个重要阶段,需要医生、护士、患者和检验人员的多方配合。有些影响因素是与医护人员关系密切,而检验人员不易了解且无法防止的,例如药物、饮食、运动标本放臵时间对检验的影响等,通过与临床及时进行联系,当有这些因素时,能做出正确的解释或进行复查。 实验室检查结果可用性的根本原因在于它们是病人在各种生理状态下的极好标志,标本的留取与检验质量的准确度和精确度是息息相关的, 是不可缺少的一个组成部分。
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⏹ 检验医学的任务不仅仅是被动地提供数据或结果,由于国内历史原因,检验科在过去很长一个时期限被定位于“医疗辅助科室”,即检验科的任务似乎只是向临床医生提供所要求的检验结果,甚至检验科主动提供一些未受指定的检验结果都被认为是“越位”,
从现代医学的要求来说检验科本应属于诊断科室,除了准确、及时地提供检验信息外还要积极参与诊断、病情分析和监测,并参与预防医学领域,其活动空间应是很广阔的。
今后客观形势的发展必然要对检验医学队伍的素质、水平和知识结构提出新的挑战,同时,临床医生也有必要进一步增加对不断前进中的检验医学和检验科工作的了解,更新知识,以保持和推动更好的合作,这种合作必将对今后医学的进步产生深远的影响. ⏹ ⏹
四 良好的检验人员素质是保证检验质量的关键 ⏹ 人是实验室质量保证体系中最积极,最活跃的因素,起主导作用,首先要具有系统的理论知识基础和专业水平。检验人员工作期间必须对检验设备性能和检测试剂及使用方法了如指掌,工作中要严格遵守操作规程,对各种仪器设备及试剂加以妥善维护和保管,认真的做好校正工作 。
其次是对于来源于临床的标本要做好查对工作,验收是否符合标本的留取要求,同时在检查方法上不断创新,以达到提高检验质量目的,尤其是应大量提高质量控制方面的分析能力,判断能力,计算能力,以适应随着医疗卫生改革的不断深入,对于临床检验质量的迫切要求。 总之,临床检验质量取决于从标本留取到检验报告发出前的每一个细致环节,只有严格遵守各个环节,才算是一个完整的质量控制体系,才能保证实验的科学性、准确性,及时为临床提供可靠的诊断依据,更好的为医学科学的发展服务。 ⏹ ⏹
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